De BIGGY agar Det er et solidt, selektivt og differensielt kulturmedium. Den ble designet for å isolere og hjelpe til med å identifisere de viktigste Candida-artene. Navnet BIGGY kommer fra forkortelsen på engelsk Bismuth Glucose Glycine Yeast.
Den opprinnelige formelen ble skapt av Nickerson, og derfor er dette mediet også kjent som Nickerson agar. For tiden består den av gjærekstrakt, glycin, dekstrose, ammoniumcitrat, vismutcitrat, natriumsulfitt og agar..
BIGGY agar er formulert for differensiering av artskompleks C. albicans, C. tropicalis, C. krusei og C. kefyr, men andre arter vokser også som Candida glabrata, C. parapsilosis, C. guilliermondii, Trichosporun sp, Geotrichum candidum og Saccharomyces cerevisiae.
Den har god følsomhet og spesifisitet, men når den sammenlignes med andre medier med lignende funksjon, er den på andreplass, overgått av CHROMagar. Av denne grunn foretrekker mange laboratorier det siste, selv om det er mye dyrere..
Det bør være klart at bruken av BIGGY Agar, så vel som andre lignende midler, hjelper en rask presumptiv identifikasjon, men aldri bekreftende. Derfor må ytterligere identifikasjonsmetoder være tilgjengelige; f.eks. Vitek 32 og API 20 identifikasjonssystemer.
Artikkelindeks
BiGGY agar regnes som et delvis selektivt medium for isolering av gjær, spesielt av slekten Candida, selv om andre slekter kan vokse.
Det er også et differensialmedium, avhengig av arten som er involvert, vil forskjellige egenskaper observeres når det gjelder utseende, farge, form og størrelse. Det regnes som et kromogent medium på grunn av utviklingen av forskjellige farger i koloniene.
Fargen på gjærkoloniene skyldes tilstedeværelsen av vismutsulfitt i agaren. Nickerson innså at gjær av slekten Candida utfører en ekstracellulær reduksjon av vismutsulfitt, og forvandler den til vismutsulfid (en uoppløselig svart substans). Dette resulterer i lysebrune til svarte kolonier..
Denne agaren inneholder gjærekstrakt og dekstrose, som gir kilden til grunnleggende næringsstoffer og energi for gjærutvikling. Glycin er et gjærvekststimulerende middel, mens det hemmer veksten av visse bakterier.
I den samme forstand fungerer ammonium og vismutcitrat, så vel som natriumsulfitt, som hemmere av bakterievekst. Agar er midlet som gir medium solid konsistens.
Vei 45 g av det dehydrerte dyrkningsmediet og oppløs det i en liter destillert vann. Rist og varm opp blandingen, kok i 1 minutt til den er helt oppløst. Dette kulturmediet er ikke autoklaverbart.
Når du kjøler ned til ca. 45 ° C i et vannbad, hell 20 ml på sterile petriskåler..
Fargen på det dehydratiserte mediet er gulgrått og tilberedt er en gulaktig hvit gel, hvor et lett flokkulerende bunnfall kan observeres.
PH bør være 6,8 ± 0,2.
Det tilberedte mediet skal oppbevares i kjøleskap (4 ° C) og beskyttes mot lys. Siden det er et medium som ikke kan autoklaveres, bør det brukes så snart som mulig. Det anbefales å bruke det innen 3 dager etter tilberedningen.
Platene inkuberes ved romtemperatur (25 ° C) i 24, 48 og 72 timer, og inkubasjonstiden kan forlenges opptil 5 dager..
Hver Candida-art utvikler visse egenskaper som skiller hverandre. Produsentene av mediet beskriver følgende egenskaper for hver art:
-Candida albicans-kompleks: utvikler seg på denne agaren som glatte, runde, brune eller svarte kolonier, med en liten mycelial kant. Med unntak av at den mørke fargen ikke sprer seg til mediet.
-Candida tropicalis: koloniene er lyse, små, mørkebrune, med et svart senter og en liten mycelgrense. Den mørke fargen diffunderer mot midten, en egenskap som er typisk for denne arten, etter å ha blitt ruvet i 72 timer..
-Candida krusei utvikler store, flate, grove utseende kolonier med en brun til svartaktig grense.
-Candida parakrusei: mellomstore kolonier, mest grove, flate. Fargen kan variere fra lys mørk rødbrun til lys rødbrun. Grensen til koloniene har omfattende, gulaktig mycelium.
-Candida stellatoidea: Utvikler mellomstore, flate, mørkebrune, nesten svarte kolonier. Mycelial utvikling er veldig knapp.
En studie utført av Yücesoy og Marol i 2003, viste at CHROMagar-medium har bedre følsomhet og spesifisitet for differensiering og identifikasjon av forskjellige Candida-arter enn BIGGY agar..
For sterilitetskontrollen inkuberes uinokulerte plater ved 25 ° C, i mørket i 24 til 48 timer, det forventes at det ikke er noen vekst av noe slag, eller fargeendring..
ATCC-stammene som anbefales for kvalitetskontroll av mediet er:
Candida albicans-kompleks ATCC 60193, Candida glabrata ATCC 2001, Candida krusei ATCC 34135. I alle av dem forventes vekst som beskrevet ovenfor..
Følgende stammer kan også brukes:
Escherichia coli ATCC 25922, Pseudomonas aeruginosa ATCC 27853 og Staphylococcus epidermidis ATCC 12228. I de to første forventes total hemming, men i tilfelle delvis voksende kolonier vil det være kremfarget.
I tilfelle av S. aureus det forventes å være fullstendig hemmet, men hvis de vokser delvis, er koloniene hvite.
Noen bakterier er i stand til å utvikle seg i dette mediet og kan til og med bli mørke i fargen, simulere en Candida-koloni, men når du smører kolonien og observerer den under et mikroskop, kastes den lett.
Tabell: Kjennetegn på koloniene til noen gjær på BIGGY agar i henhold til arbeidet med Yücesoy M og Marol S.
Ingen har kommentert denne artikkelen ennå.