De selenittbuljong Det er et selektivt flytende kulturmedium. Den ble designet av Leifson for berikelse av prøver der det er mistanke om nærvær av enteropatogene bakterier av slekten Salmonella..
Dette mediet oppfyller kravene fra American Public Health Association (APHA), og er derfor akseptert for undersøkelse av tilstedeværelsen av Salmonella i prøver av avføring, urin, flytende eller fast mat, vann, blant andre..
Dens kjemiske sammensetning favoriserer utvinning av disse mikroorganismene og hemmer igjen andres vekst. Det er først og fremst giftig for de fleste bakterier som tilhører Enterobacteriaceae-familien. Imidlertid tillater det også utvinning av Shigella-stammer og hemmer ikke veksten av Pseudomonas og Proteus..
Den består av vannfritt natriumhydrogen selenitt, vannfritt natriumfosfat, peptoner og laktose. Det er også en variant som cystin tilsettes, derav navnet selenitt-cystinbuljong..
For tiden er bruk av selenitt-cystin-buljong foretrukket, siden en høyere prosentandel av Salmonella-utvinning oppnås, tilsvarende den som observeres med andre selektive medier for samme formål, så som natriumtetrakionat-buljong..
Artikkelindeks
Peptonene i buljongen tjener som næringsstoffer for riktig utvikling av mikroorganismer. Salmonellastammer bruker peptoner som kilde til nitrogen, vitaminer og aminosyrer.
Laktose er det gjærbare karbohydratet, mens natriumselenitt er det hemmende stoffet som stopper veksten av Gram-positive bakterier og de fleste bakteriene som er tilstede i tarmfloraen, spesielt de av Enterobacteriaceae-familien. Natriumfosfat er bufferen som stabiliserer pH i mediet.
Når det gjelder selenittbuljongvarianten som inneholder L-cystin, er denne tilleggsforbindelsen et reduksjonsmiddel som minimerer selenittoksisitet og øker Salmonella-utvinningen..
Hvis du har komponentene i blandingen, kan du veie:
4 g vannfritt natriumhydrogen selenitt.
10 g vannfritt natriumfosfat.
5 gram peptoner.
4 g laktose.
Oppløs forbindelsene i 1 liter sterilt destillert vann. Den kan varmes opp litt for å oppløses helt.
Noen laboratorier utsetter mediet i 10 minutter i flytende damp for å sterilisere det, da en autoklav ikke skal brukes. Hvis mediet er sterilisert, kan det oppbevares i kjøleskapet til bruk..
Det kan også tilberedes ikke-sterilt og serveres direkte 10 til 15 ml til sterile reagensglass.
I dette tilfellet skal den hvile og bruke umiddelbart. Siden mediet ikke er sterilt, kan det ikke lagres i kjøleskapet for senere bruk..
Hvis det kommersielle mediet er tilgjengelig, veier du 23 g av det dehydratiserte mediet og oppløser det i en liter sterilt destillert vann. Varm opp en stund for å fullføre oppløsningen. Ikke autoklaver. Server aseptisk 10 eller 15 ml i sterile reagensglass.
Den endelige pH-verdien til mediet må være 7,0 ± 0,2.
Det skal bemerkes at fargen på det dehydratiserte mediet er beige og preparatet er lett og gjennomsiktig rav..
Den inneholder de samme forbindelsene som selenittbuljong, men 10 mg cystin tilsettes. Resten av prosedyren er nøyaktig den samme som beskrevet ovenfor.
Dette mediet er spesielt å bruke i epidemiologiske studier, i tilfeller der sykdommen ikke er i akutt stadium, asymptomatiske pasienter eller friske bærere.
Isolering av slekten Salmonella er generelt vanskelig, da de normalt bare er lite forurensende prøver. Siden det er i få mengder, overlappes det lett av veksten av andre bakterieslakter som finnes i større mengde..
På den annen side blir råmaterialet som bearbeidet mat blir laget ofte utsatt for blant annet varme, dehydrering, bruk av desinfeksjonsmidler, stråling og konserveringsmidler..
Derfor blir Salmonellas tilstede i råmaterialet misbrukt ved å utsette produktet for de ovennevnte industrielle prosessene. På samme måte, når det gjelder kliniske prøver som avføring, kan stammene være svake hvis de kommer fra pasienter som har blitt behandlet med antibiotika..
Derfor bør enhver prøve der det er mistanke om tilstedeværelse av Salmonella være pre-anriket i laktosekraft, og deretter beriket i selenittbuljong for å optimalisere utvinningen i selektive medier, slik som SS-agar, xylose-agar, lysin-deoksykolat (XLD), enterisk Hektoen agar (HE) og lysegrønn agar, blant andre.
For avføringsprøver, ta 1 g prøve og suspendere i et rør med 10 til 15 ml selenittbuljong. Hvis avføringen er flytende, ta 1 ml og suspendere i buljongen. For rektale vattpinner, tapp vattpinnematerialet ut i buljongen.
I faste matprøver tar du 1 gr og suspenderes i selenittbuljongen.
Bland i flytende mat i like deler med selenittbuljongen i dobbel konsentrasjon.
For urinprøver, sentrifuger, kast supernatanten, ta alt sedimentet og suspender det i selenittbuljongen..
Buljongene inkuberes ved 37 ° C i 24 timers inkubasjon. Bakterievekst fremgår av turbiditet. Et ekstra rør per prøve kan også inkluderes for inkubasjon ved 42 ° C. Deretter såning av selektive faste medier fra selenittbuljongen.
For å kontrollere sterilitet inkuberes en selenittbuljong fra hver uinokulerte sats ved 37 ° C i 24 timer. Det forventes ingen uklarhet eller fargeendring av mediet..
For å kontrollere at mediet fungerer som det skal, kan kjente stammer brukes, for eksempel:
Salmonella enteritidis ATCC 13076, Salmonella typhimurium ATCC 14028, Salmonella choleraesuis ATCC 12011, Escherichia coli ATCC 25922 og Proteus mirabilis ATCC 43071.
De forventede resultatene er:
Selenittbuljongmedium er giftig for menneskelig hud, og derfor bør direkte kontakt unngås..
Ingen har kommentert denne artikkelen ennå.