De middels Stuart Det er en halvfast agar eller en buljong uten næringsstoffer, som brukes til transport av biologiske prøver. Hensikten er å holde stammene som er til stede i prøven levedyktige i en viss tid, men uten å øke den mikrobielle populasjonen.
Den ble opprettet av Moffet, Young og Stuart i 1948 og senere modifisert av Toshach og Patsula. Den består av natriumglyserofosfat, natriumtioglykolat, kalsiumklorid og agar-agar. Sistnevnte er tilstede i det halvfaste mediet og fraværende i væsken. Noen laboratorier legger til metylenblått.
De brukes vanligvis når det ikke er mulig å så prøven med en gang. I dette tilfellet plasseres prøven i transportmediet, mens den overføres til laboratoriet som skal behandle kulturen..
På denne måten er det garantert at tilstedeværende mikroorganismer forblir i live til de inokuleres i det tilsvarende kulturmediet..
Opprinnelig var bruken ment å transportere urinrør eller vaginale prøver der tilstedeværelsen av Neisseria gonorrhoeae. Senere skjønte de at dets nytte kunne være bredere.
Stuart-mediet ble funnet å være svært effektivt for å bevare labile og kjedelige mikroorganismer som Neisseria meningitidis, influensa, Streptococcus pyogenes, Streptococcus pneumoniae, Corynebacterium diphteriae, Bordetella pertussis, blant andre. I tillegg til andre ikke-plagsomme mikroorganismer som Enterobacteria.
Stuart-mediet unngår i utgangspunktet uttørking av prøven, opprettholder den osmotiske balansen og holder mikroorganismene på en ideell pH. På den annen side inneholder dette mediet strategisk ikke næringsstoffer, og forhindrer dermed mikroorganismer i å formere seg.
På markedet er det spesielle prøvetransportinnretninger som inneholder dette eller andre transportmidler, kalt culturette. De kan også tilberedes i laboratoriet.
Artikkelindeks
Formålet med Stuart transportmiddel er å holde prøvene så nær sin opprinnelige tilstand, til de er behandlet..
Natriumglyserofosfat og kalsiumklorid er et buffersystem som fungerer ved å opprettholde pH og osmolaritet..
I mellomtiden virker natriumtioglykolat som et reduksjonsmiddel, og i tilfelle det inneholder agar gir dette en halvfast konsistens for å forsinke oksygeneringen av mediet. Til slutt er metylenblått en oksidasjonsindikator, det vil si at den oppdager tilstedeværelsen av oksygen.
Det halvfaste mediet med redoksindikator er ideelt for transport av prøver der det er mistanke om tilstedeværelse av anaerobe bakterier.
Stuart-mediet, som alle transportmidler, oppfyller visse egenskaper, inkludert:
-Opprettholder levedyktige mikrobielle stammer til stede uten å formere seg.
-Inneholder ingen næringsstoffer; Dens forbindelser er rettet mot å holde prøven hydrert, under tilstrekkelige forhold med pH og osmolaritet.
-Inhiberer autolysatet av noen delikate mikroorganismer, som Pneumococcus.
-Bruken er midlertidig, den skal ikke forlenges for lenge.
Natriumglyserofosfat 10 gr
Natriumtioglykollat 1,0 gr
Kalsiumklorid 0,1 gr
Metylenblått 0,002 gr
Agar-agar 3 gr
Destillert vann 1 L
Bland komponentene og varme til de er helt oppløst. Hell i rør eller spesielle vattpinner. De føres inn i autoklaven og steriliseres ved 121 ° C i 15 minutter. La rørene avkjøles i oppreist stilling (i form av en plugg). Oppbevares ved romtemperatur.
Vei 14,1 g av mediet i 1 liter destillert vann. Varm omrøring ofte til den er helt oppløst, den kan kokes. Resten av prosedyren som allerede beskrevet.
Det dehydratiserte mediet er kremfarget og tilberedt skal være blå på overflaten. Dette skyldes tilstedeværelsen av metylenblått.
Mediumets pH må justeres til 7,4 ± 0,2
Ingredienser
Natriumglyserofosfat 10 gr
Sodium thioglycollate 1 gr
Kalsiumkloriddihydrat 0,1 gr
Destillert vann 1000 ml
Den har de samme ingrediensene som det halvfaste stoffet, men det har ikke agar eller metylenblått. I dette tilfellet blandes komponentene uten oppvarming og 0,5 ml fordeles i 16 x 125 mm rør med skruelokk..
Den steriliseres i en autoklav ved 121 ° C i 10 minutter. For prøvetaking bør dacron-vattpinner brukes hvis prøven er for PCR eller rayon hvis den er for kultur.
Rørene oppbevares ved romtemperatur.
Kommersielt er det spesielle prøvetransportinnretninger kalt culturette; Denne enheten er et langstrakt og tynt rør som har en vattpinne inni, og på slutten er det et segment som inneholder det halvfaste eller flytende Stuart-mediet.
Enheten åpnes og prøven tas med vattpinnen. Deretter føres den tilbake i røret til spissen av vattpinnen er satt inn i det halvfaste transportmediet; noen tar med en polyuretansvamp impregnert med flytende Stuart-medium, som prøven konserveres med ved å holde den våt.
I tilfelle mistanke om tilstedeværelsen av delikate mikroorganismer, bør bomullspinner med kull brukes til å samle prøven..
Prøvene som kan tas med vattpinner eller overføres i dette mediet er svelgeksudater, rektale vattpinner og forskjellige sekreter, inkludert: vaginal, urinrør, sår, øye, øre og abscess..
Under overføring av prøven i transportmediet til laboratoriet må det unngås å utsette mediet for ekstreme miljøforhold (for kaldt eller for varmt). Plutselige endringer i atmosfæretrykket bør også unngås.
Tiden der mediet er i stand til å holde en mikroorganisme levedyktig vil avhenge av den aktuelle belastningen. For mikroorganismer av slekten Neisserias og Haemophilus kan de for eksempel være levedyktige i opptil 24 timer, men stammer som Salmonella eller Shigella kan vare dager og til og med uker..
Hvis det anslås at behandlingen av prøven kan ta mer enn 4 dager, er det å foretrekke å fryse prøven ved -70 ° C.
Det tilberedte transportmidlet eller den kommersielle kulturen må ha en merkelapp der følgende informasjon vil bli plassert:
Pasientens for- og etternavn: unngå prøveforvirring.
Identifikasjonsnummer: det er praktisk å holde en ordre på jobben.
Eksempel på samlingskilde: hjelper bakteriologen med å velge riktig kulturmedium.
Behandlingslege: Noen ganger er det nødvendig for mulige konsultasjoner.
Dato og tidspunkt for prøvetaking: Det er nødvendig for aksept eller avvisning av prøven i henhold til tiden som har gått mellom å ta prøven og motta den i laboratoriet..
Annen informasjon som vil være veldig nyttig å legge ved er:
Den formodede diagnosen: veileder i tillegg av spesielle kulturmedier i henhold til diagnostisk mistanke.
Antibiotisk behandling: det er nyttig å være festet til antibiogrammet.
All denne informasjonen er viktig for å garantere god behandling av prøven..
For å evaluere ytelsen til Stuart-mediet kan kjente stammer inokuleres og holdes ved 25 ° C, for eksempel: Bordetella pertussis ATCC 9340, influensa ATCC 19418, Neisseria gonorrhoeae ATCC 19424, Neisseria meningitidis ATCC 13090, Streptococcus pneumoniae ATCC 6301.
I alle tilfeller forventes det å gjenopprette den aktuelle mikroorganismen, bevart i 24 timer..
På den annen side kan andre stammer brukes som: Shigella flexneri ATCC 12022, Staphylococcus aureus ATCC 6538, Streptococcus pyogenes ATCC 12344, Enterococcus faecalis ATCC 33186, Pseudomonas aeruginosa ATCC 27853 og Escherichia coli ATCC 11775.
I alle tilfeller forventes rikelig utvinning i opptil 96 timer..
Noen studier forsikrer at glyserofosfatet som er tilstede i Stuart-mediet kan metaboliseres av noen koliforme stoffer, blant andre gramnegative bakterier, og derfor formere seg i dette mediet..
Denne risikoen øker jo lenger prøvebehandlingen er forsinket. På samme måte påvirker eksponeringen av Stuart-mediet for høye temperaturer under overføringen dette.
Ingen har kommentert denne artikkelen ennå.