Mørke feltmikroskopfunksjoner, deler, funksjoner

2290
Basil Manning

De mørkt feltmikroskop det er et spesielt optisk instrument som brukes i visse laboratorier. Dette er resultatet av en modifikasjon gjort i Brightfield-mikroskopi. Mørkfeltmikroskopi kan oppnås ved transbelysning eller ved epi-belysning.

Den første er basert på å blokkere lysstrålene som når kondensatoren direkte, ved bruk av enheter som griper inn før lysstrålene når kondensatoren..

Dark-field microscope / Treponemes seen in dark-field microscopes. Kilde: Dietzel65 [CC BY-SA 3.0 (https://creativecommons.org/licenses/by-sa/3.0).eu/Judith Miklossy, Sandor Kasas, Anne D Zurn, Sherman McCall, Sheng Yu og Patrick L McGeer [CC BY 2.0 (https://creativecommons.org/licenses/by/2.0)]

Det mørke feltet med overført lys gjør det mulig å markere strukturene, og være i stand til å observere ekstremt tynne partikler. Strukturer er sett med en viss refraksjon eller lysstyrke på en mørk bakgrunn.

Mens epi-belysningseffekten oppnås med innfallende eller skrått lys. I dette tilfellet må mikroskopet være utstyrt med et spesielt filter i form av en halvmåne..

Med innfallende belysning er de observerte strukturene preget av å presentere en visuell effekt i høy lettelse. Denne egenskapen gjør det mulig å markere kantene på de suspenderte partiklene.

I motsetning til lysfeltmikroskopi er mørkfeltmikroskopi spesielt nyttig for å visualisere ferske preparater som inneholder suspenderte partikler, uten noen form for flekker..

Det har imidlertid flere ulemper, blant dem at det ikke kan brukes til tørre preparater eller fargede preparater. Den har ikke en god oppløsning. I tillegg, for å sikre et godt bilde, kan den numeriske blenderåpningen for målene ikke overstige kondensatorens..

Artikkelindeks

  • 1 Funksjoner
  • 2 Deler av darkfield-mikroskopet
    • 2.1 -Mekanisk system
    • 2.2 -Optisk system
    • 2.3 -Belysningssystem
  • 3 funksjoner
  • 4 Fordeler
  • 5 Ulemper
  • 6 Referanser

Kjennetegn

Sammensetningen av det mørke feltmikroskopet presenterer viktige modifikasjoner med hensyn til lysfeltet, siden fundamentene til begge mikroskopiene er motsatte..

Mens i det lyse feltet konsentreres lysstrålene slik at de passerer direkte gjennom prøven, i det mørke feltet er bjelkene spredt slik at bare de skrå strålene når prøven. Disse blir deretter spredt av samme prøve, og overfører bildet mot målet.

Hvis du prøvde å fokusere et lysbilde uten en prøve, ville en mørk sirkel bli observert, siden uten en prøve er det ingenting som sprer lyset mot målet..

For å oppnå ønsket effekt i synsfeltet er det nødvendig å bruke spesifikke kondensatorer, så vel som membraner som hjelper med å kontrollere lysstrålene..

I et mørkt felt synsfelt virker elementene eller partiklene i suspensjon lyse og brytende mens resten av feltet er mørkt, noe som gir en perfekt kontrast..

Hvis det brukes skrått eller innfallende lys, oppnås en kanteffekt med høy lettelse i de observerte strukturene.

Darkfield-mikroskopdeler

Kilde: amazon.com

-Mekanisk system

Rør

Det er enheten som bildet reflekteres og forstørres av målet beveger seg gjennom til det når okularet eller okularet.

Røre

Det er støtten der de forskjellige målene er lokalisert. Målene er ikke faste, de kan fjernes. Revolveren kan rotere på en slik måte at målet kan endres når operatøren trenger det..

Makroskrue

Denne skruen brukes til å fokusere prøven, den beveger seg fremover eller bakover for å bringe prøven nærmere eller lenger fra målet, og bevegelsen er grotesk..

Mikrometer skrue

Mikrometerskruen beveges fremover eller bakover for å flytte prøven nærmere eller lenger fra målet. Den mikrometriske skruen brukes til veldig fine eller delikate bevegelser, nesten umerkelige. Han er den som oppnår det ultimate fokuset.

Platen

Det er støtten der prøven vil hvile på lysbildet. Den har en sentral åpning som lysstrålene passerer gjennom. Når makro- og mikrometerskruene beveges, hever eller senker scenen, avhengig av skruens bevegelse..

Bilen

Vognen gjør at hele prøven kan krysses med målet. De tillatte bevegelsene er fremover og bakover og omvendt, og fra venstre til høyre og omvendt.

Holder tang

Disse er plassert på scenen, er laget av metall og har den funksjonen å holde lysbildet for å forhindre at det ruller under observasjon. Det er viktig at prøven forblir fast mens den observeres. Festene er nøyaktig størrelse for å motta lysbildet.

Arm eller håndtak

Armen forbinder røret med basen. Det er stedet der mikroskopet skal holdes når det skal flyttes fra den ene siden til den andre. Med den ene hånden tar du armen og med den andre hånden holder du basen.

Base eller fot

Som navnet antyder, er det basen eller støtten til mikroskopet. Takket være basen er mikroskopet i stand til å forbli fast og stabilt på en flat overflate.

-Optisk system

mål

De er sylindriske i form. De har en linse i bunnen som forstørrer bildet som kommer fra prøven. Målene kan være av forskjellige forstørrelser. Eksempel: 4,5X (forstørrelsesglass), 10X, 40X og 100X (nedsenkningsobjektiv).

Nedsenkingsmålet er så navngitt fordi det krever plassering av noen få dråper olje mellom objektet og prøven. De andre kalles tørre mål.

Målene er trykt med de egenskapene de har.

Eksempel: produsentens merke, korrigering av feltkurve, aberrasjonskorreksjon, forstørrelse, numerisk blenderåpning, spesielle optiske egenskaper, nedsenkingsmedium, rørlengde, brennvidde, dekkglasstykkelse og kodering.

Linsene har en frontlinse plassert nederst og en bakre linse øverst.

Okularer

Gamle mikroskoper er monokulære, det vil si at de bare har ett okular, og moderne mikroskop er kikkert, det vil si at de har to okularer..

Okularene er sylindriske og hule i form. Disse har konvergerende linser inni som utvider det virtuelle bildet som linsen skaper..

Okularet slutter seg til røret. Sistnevnte lar bildet som overføres av målet nå okularet, som vil forstørre det igjen.

Okularet i den øvre delen inneholder en linse som kalles okularet, og i den nedre delen huser det en linse som kalles samleren.

Den har også en membran, og avhengig av hvor den er plassert, vil den ha et navn. De som er plassert mellom begge linsene kalles okular Huygens, og hvis det er plassert etter de 2 linsene, kalles det Ramsden okular. Selv om det er mange andre.

Forstørrelsen på okularet varierer fra 5X, 10X, 15X eller 20X, avhengig av mikroskopet.

Det er gjennom okularet eller okularet at operatøren kan se prøven. Noen modeller har en ring på venstre okular som er bevegelig og tillater bildejustering. Denne justerbare ringen kalles en diopterring.

-Lys system

Lampe

Det er kilden til belysning og ligger i bunnen av mikroskopet. Lyset er halogen og sendes ut nedenfra og opp. Generelt er lampen som mikroskop har 12 V..

Membran

Membranen til mørkfeltmikroskop mangler en iris; i dette tilfellet forhindrer det at strålene som kommer fra lampen når prøven direkte, bare de skrå bjelkene vil berøre prøven. Disse bjelkene som er spredt av strukturene som er tilstede i prøven, er de som vil passere til målet.

Dette forklarer hvorfor strukturer ser lyse og lysende ut i et mørkt felt..

Kondensator

Kondensatoren til et mørkt feltmikroskop skiller seg fra det for et lyst felt.

Det er to typer: brytningskondensatorer og refleksjonskondensatorer. Sistnevnte er i sin tur delt inn i to kategorier: paraboloider og kardioider..

Brytende kondensatorer

Denne typen kondensator har en plate som er plassert for å bryte lysstråler, den kan være plassert på toppen av frontlinsen eller på baksiden..

Det er veldig enkelt å improvisere en kondensator av denne typen, siden det er nok å plassere en plate laget av svart papp som er mindre enn linsen (membran) foran kondensatorens frontlinser..

Et lysfeltmikroskop kan konverteres til et mørkefeltmikroskop ved hjelp av dette tipset..

Refleksjonskondensatorer

Det er de som brukes av stereomikroskop. Det er to typer: paraboloider og kardioider..

  • Paraboloider: De har en slags krumning som kalles paraboloider på grunn av deres likhet med en parabel. Denne typen kondensator er mye brukt i studiet av syfilis, siden det gjør det mulig å observere Treponemes.
  • Kardioid: Krumningen til kondensatoren er i form av et hjerte, derav navnet "kardioid", kondensatoren har samme navn. Den har en membran som er justerbar.

Funksjoner

-Den brukes til å undersøke tilstedeværelsen av Treponema pallidum i kliniske prøver.

-Også nyttig for å observere Borrelias og Leptospiras.

-Det er ideelt for å observere atferd in vivo av celler eller mikroorganismer, så lenge det ikke er nødvendig å detaljere spesifikke strukturer.

-Den er ideell for å fremheve kapselen eller veggen av mikroorganismer.

 Fordel

-Brytbar kondensator mørkfelt mikroskop er billigere.

-Bruken er veldig nyttig i 40X forstørrelse.

-De er ideelle for å observere prøver som har en brytningsindeks som ligner mediet de er funnet i. For eksempel celler i kultur, gjær eller bevegelige bakterier som spiroketer (Borrelias, Leptospiras og Treponemas).

-Du kan se cellen in vivo, som gjør det mulig å evaluere deres atferd. For eksempel Brownian-bevegelse, bevegelse av flagella, bevegelse ved utslipp av pseudopoder, prosess med mitotisk deling, klekking av larver, spiring av gjær, fagocytose, blant andre..

-Gjør det mulig å markere kantene på strukturer, for eksempel kapsel og cellevegg.

-Oppdelte partikler kan analyseres.

-Bruk av fargestoffer er ikke nødvendig.

 Ulemper

-Spesiell forsiktighet må utvises når du monterer preparatene, for hvis de er for tykke, vil de ikke bli observert godt.

-Bildeoppløsningen er lav.

-Darkfield-mikroskoper som bruker brytningskondensatorer, har en veldig lav prosentandel av lysstyrken.

-For å forbedre bildekvaliteten med et nedsenkningsobjektiv (100X) er det nødvendig å redusere den numeriske blenderåpningen for målene og dermed øke den for den lysende kjeglen. For dette er det viktig å innlemme en ekstra membran som kan regulere objektets numeriske blenderåpning..

-Du kan ikke visualisere tørre lysbilder eller fargede lysbilder, med mindre de er viktige flekker.

-Det tillater ikke visualisering av visse strukturer, spesielt interne.

-Darkfield-mikroskop er dyrere.

Referanser

  1. "Mørkfeltmikroskop." Wikipedia, The Free Encyclopedia. 26. august 2018, 00:18 UTC. 30. juni 2019, 01:06
  2. Agudelo P, Restrepo M, Moreno N. Diagnose av leptospirose fra blodprøver og kultur ved observasjon under et mørkt feltmikroskop. Biomedisinsk. 2008; 28 (1): 7-9. Tilgjengelig fra: scielo.org
  3. Rodríguez F. Typer optiske mikroskop. Klinisk og biomedisinsk laboratorieblogg. Tilgjengelig på: franrzmn.com
  4. Wikipedia-bidragsytere. Mørkfeltmikroskopi. Wikipedia, The Free Encyclopedia. 19. oktober 2018, 00:13 UTC. Tilgjengelig på: wikipedia.org
  5. Bhatia M, Umapathy B, Navaneeth B.En evaluering av mørk feltmikroskopi, kultur og kommersielle serologiske sett i diagnosen leptospirose. Indiske J Med Microbiol.2015; 33 (3): 416-21. Tilgjengelig på: nlm.nih.gov

Ingen har kommentert denne artikkelen ennå.