De nefelometri består av å måle strålingen forårsaket av partikler (i oppløsning eller i suspensjon), og dermed måle kraften til den spredte strålingen i en annen vinkel enn retningen til den innfallende strålingen.
Når en suspendert partikkel treffes av en lysstråle, er det en del av lyset som reflekteres, en annen del absorberes, en annen avbøyes og resten overføres. Dette er grunnen til at når lyset treffer et gjennomsiktig medium der det er en suspensjon av faste partikler, virker suspensjonen uklar..
Artikkelindeks
I det øyeblikket en lysstråle treffer partiklene til et stoff i suspensjon, forandrer strålens forplantningsretning retning. Denne effekten avhenger av følgende aspekter:
1. dimensjoner av partikkelen (størrelse og form).
2. kjennetegn ved suspensjonen (konsentrasjon).
3. bølgelengde og lysintensitet.
4. uhell lys avstand.
5.deteksjonsvinkel.
6. brytningsindeks for mediet.
Nevelometeret er et instrument som brukes til å måle suspenderte partikler i en væskeprøve eller i en gass. Så en fotocelle plassert i en vinkel på 90 ° mot en lyskilde oppdager stråling fra partikler som er tilstede i suspensjonen..
Dessuten avhenger lyset som partiklene reflekterer mot fotocellen av partiklene. Diagram 1 presenterer de grunnleggende komponentene som utgjør et nefelometer:
I nefelometri er det viktig å ha en strålekilde med høy lysutgang. Det finnes forskjellige typer, alt fra xenonlamper og kvikksølvdamplamper, wolframhalogenlamper, laserstråling, blant andre..
Dette systemet er plassert mellom strålingskilden og kyvetten, slik at på denne måten unngås stråling med forskjellige bølgelengder sammenlignet med ønsket stråling på kyvetten..
Ellers vil fluorescensreaksjoner eller varmeeffekter i løsningen forårsake avvik fra målingen..
Det er en generelt prismatisk eller sylindrisk beholder, og den kan ha forskjellige størrelser. I dette finner du løsningen som studeres.
Detektoren er lokalisert i en bestemt avstand (vanligvis veldig nær kyvetten) og har ansvaret for å oppdage strålingen spredt av partiklene i suspensjonen..
Generelt er det en elektronisk maskin som mottar, konverterer og behandler data, som i dette tilfellet er målingene innhentet fra studien som ble utført..
Hver måling er gjenstand for en prosentandel av feil, som hovedsakelig er gitt av:
Forurensede kyvetter: i kuvettene reduserer ethvert middel utenfor løsningen som studeres, enten det er i eller utenfor kyvetten, det strålende lyset på vei til detektoren (defekte kyvetter, støv som henger på kuvettens vegger).
Innblanding: tilstedeværelsen av noe mikrobiell forurensning eller uklarhet sprer strålingsenergien og øker dispersjonens intensitet.
Fluorescerende forbindelser: dette er de forbindelsene som, når de blir begeistret av innfallende stråling, forårsaker feilaktige og høye spredningstetthetsavlesninger.
Oppbevaring av reagenser: feil systemtemperatur kan forårsake ugunstige studieforhold og vil tilskynde tilstedeværelsen av uklare eller utfelte reagenser.
Svingninger i elektrisk kraft: For å forhindre at innfallende stråling er en feilkilde, anbefales spenningsstabilisatorer for ensartet stråling.
Siden strålingseffekten til den oppdagede strålingen er direkte proporsjonal med massekonsentrasjonen av partiklene, har nefelometriske studier-i teorien- en høyere metrologisk følsomhet enn andre lignende metoder (som turbidimetri).
I tillegg krever denne teknikken fortynnede løsninger. Dette gjør at både absorpsjon og refleksjonsfenomener kan minimeres..
Nephelometric studier har en veldig viktig posisjon i kliniske laboratorier. Søknadene spenner fra bestemmelse av immunoglobuliner og akutte fase proteiner, komplement og koagulasjon.
Når en biologisk prøve inneholder et antigen av interesse, blandes den (i en bufferløsning) med et antistoff for å danne et immunkompleks..
Nephelometry måler mengden lys som spres av antigen-antistoffreaksjonen (Ag-Ac), og på denne måten oppdages immunkomplekser.
Denne studien kan utføres på to måter:
Denne teknikken kan brukes til sluttpunktsanalyse, hvor antistoffet til den studerte biologiske prøven inkuberes i tjuefire timer..
Ag-Ac-komplekset måles ved hjelp av et nefelometer, og mengden spredt lys sammenlignes med den samme målingen som ble utført før komplekset ble dannet..
I denne metoden blir hastigheten på kompleksdannelse kontinuerlig overvåket. Reaksjonshastigheten avhenger av konsentrasjonen av antigenet i prøven. Her blir målingene tatt som en funksjon av tiden, så den første målingen blir tatt på tidspunktet "null" (t = 0).
Kinetisk nefelometri er den mest brukte teknikken, siden studien kan utføres på 1 time, sammenlignet med den lange tidsperioden til sluttpunktmetoden. Dispersjonsforholdet måles like etter tilsetning av reagenset.
Derfor, så lenge reagenset er konstant, anses mengden antigen som er tilstede som direkte proporsjonal med endringshastigheten.
Nephelometry brukes vanligvis i vannkjemisk kvalitetsanalyse, for å bestemme klarhet og for å kontrollere behandlingsprosessene..
Det brukes også til å måle luftforurensning, der konsentrasjonen av partiklene bestemmes ut fra spredningen de produserer i et innfallende lys..
Ingen har kommentert denne artikkelen ennå.