De laktofenolblått eller bomullsblå er et preparat med enkle fargestoffer. Den brukes i kliniske laboratorier til å fargelegge soppstrukturer som hyfer, kimrør og sporer..
Det hjelper i den presumptive eller foreløpige diagnosen av visse sopper, men det er alltid tilrådelig å forsterke diagnosen med mer spesifikke tester, for eksempel biokjemiske eller serologiske tester..
Laktofenolblått består av melkesyre, anilinblått, glyserin, fenol og avionisert vann. Den kan tilberedes i laboratoriet, eller den kan kjøpes klar til bruk. Når den er klargjort, er den klar til bruk, den må under ingen omstendigheter fortynnes, da denne handlingen vil gi forferdelige resultater.
Konsentrasjonen av komponentene gjør den ideell for farging av soppstrukturer, siden fenol eliminerer den medfølgende bakterielle mikrobiota, mens melkesyre genererer en beskyttende film rundt soppstrukturen. Til slutt har anilinblått tilhørighet til å feste seg til soppens strukturer..
Artikkelindeks
Med laktofenolblått utføres en enkel farging av soppstrukturene til en viss mykologisk kultur. Det kalles enkelt fordi det bare bruker ett fargestoff.
Laktofenolblått, bortsett fra farging, fungerer også som en klaringsmiddel for prøven, takket være den felles virkningen av melkesyre og fenol, i tillegg oppfører fenol seg som en mordant og forhindrer samtidig lysis av mikroorganismen ved å hemme hydrolysen enzymer som kan være til stede.
Mens melkesyre bevarer morfologien til soppens strukturer.
På den annen side har anilinblått egenskapen til å feste eller binde seg til kitinholdige strukturer. Strukturer flekker lyseblå.
Det skal bemerkes at celleveggen til soppmikroorganismer, spesielt muggsopp, inneholder kitin, og derfor er dette fargestoffet ideelt for farging av disse mikroorganismer..
Laktofenolblå løsning er en lett overskyet, lett overskyet, vandig fargestoff, sterkt sur, lyseblå i fargen. Den forblir stabil hvis den oppbevares mellom 15 ° C og 25 ° C. Flasken må holdes ordentlig lukket. Det er irriterende og etsende for hud og slimhinner.
Formelen for å fremstille en liter laktofenolblå er som følger:
-250 g / l melkesyre
-1,0 g / L anilinblått eller metylblått
-500 g / l glyserin
-250 g / l fenol
-250 ml avionisert eller destillert vann.
Fenolen oppløses i det tidligere oppvarmede vannet. Melkesyre og glyserin tilsettes og blandes veldig godt. Til slutt oppløses anilinblått. Blandes igjen og er klar til bruk.
Porsjonene for å tilberede 80 ml laktofenolblå løsning er:
-20 g fenolkrystaller
-20 ml melkesyre
-40 ml glyserin eller glyserol
-20 ml destillert vann.
Den brukes til å flekke soppstrukturer og, gjennom de morfologiske egenskapene som observeres på mikroskopisk nivå, for å kunne stille en presumptiv diagnose av soppen.
- En ren kultur av soppen er hentet som du vil observere strukturene fra.
- Det er å foretrekke å arbeide i en laminær hette, eller under tenneren, ved bruk av maske og hansker, siden det er nødvendig å overholde biosikkerhetsstandarder, fordi de fleste former er lette å spre seg i miljøet og derfor utgjør en fare for operatøren..
- En dråpe laktofenolblått plasseres på et lysbilde..
- Et lite kvadrat med tape av god kvalitet blir kuttet og veldig nøye festet til enden av platinahåndtaket, allerede sterilisert og kaldt..
- Platinahåndtaket nærmer seg den mest overfladiske delen av soppkolonien, og kulturen berøres veldig nøye, nøyaktig hvor klebebåndet ligger..
- Deretter blir den tatt til lysbildet og plassert rett over dråpen laktofenolblått, og pass på at båndet er perfekt forlenget og smurt med fargestoffet. Platinahåndtaket er veldig forsiktig fjernet.
- Nok en dråpe laktofenolblått er plassert på båndet og et dekkglass på toppen. Ikke bruk for mye press for å unngå å ødelegge soppens strukturer, da disse er ekstremt skjøre. Fargestoffet skal få virke i omtrent 3 til 4 minutter.
- Etter denne tiden er preparatet klar til å bli observert under et mikroskop i 10X eller 40X forstørrelse. Hvis observasjon ved 100X er nødvendig, bruk nedsenkningsolje.
- Svampens strukturer er generelt farget blå, med unntak av dematiaceous sopp som vil beholde sin karakteristiske brune farge av denne typen sopp..
Hvis det er nødvendig å studere en direkte biologisk prøve, som sputum, pus, ekssudater, sekreter, blant andre, må disse ha en tidligere prosedyre for dekontaminering av prøven. NaOH-løsning brukes til dette.
I tilfelle hårprøver kan disse farges direkte.
Flere berørte hår (totalt 10) er tatt fra de formodede tinea capitis-lesjonene (alopeciske områder) og plassert på et lysbilde (3 til 4 hår per lysbilde). Noen få dråper laktofenolblått plasseres på toppen og dekkes straks med et dekkglass..
Ta tak i lysbildet med tang og varm forsiktig over en brenner. For å gjøre dette, foreta 3 til 4 raske passeringer gjennom flammen. Observer mikroskopet ved 40X og se etter sporer utenfor eller inne i håret (henholdsvis ectothrix eller endothrix). Tilsett om nødvendig olje og følg med 100X.
Etter å ha ruvet den formodede kulturen til Candida albicans i humant serum i 2 til 4 timer ved 37 ° C, ta en del av løsningen og flekk med laktofenolblått. Preparatet observeres under mikroskop ved 40X. Kimrøret er til stede og blastosporene flekker lyseblå.
National Fire Protection Association (NFPA) oppretter sikkerhetsdatabladet for kjemiske stoffer når det gjelder risikoen som det representerer i henhold til forskjellige aspekter, disse er symbolisert med en farget rombe og et tall fra 0-4.
Helsefare er identifisert i blått, brennbarhet i rødt, ustabilitet eller reaktivitet i gult, og enhver spesiell fare i hvitt..
Helsefaren som utgjøres av laktofenolblått i henhold til NFPA er nivå 3. Dette betyr at stoffet er ekstremt farlig ved inntak eller i direkte kontakt med hud eller slimhinner..
Det er et veldig etsende og irriterende stoff.
Ved hudkontakt og slimhinner forårsaker det alvorlige forbrenninger.
Ved inntak kan det forårsake hodepine, forvirring, sløvhet, bevisstløshet, åndedrettsstans og til og med død..
I følge NFPA er Lactophenol Blue vurdert til nivå 1 for brennbarhet. Dette betyr at den bare brenner hvis den varmes opp over 94 ° C..
Oppført under NFPA på nivå 0 (null) for reaktivitet. Dette betyr at det ikke har noen risiko for reaktivitet, det vil si at det er et kjemisk stabilt stoff..
Tilbyr ingen ekstra spesielle farer.
Ingen har kommentert denne artikkelen ennå.