De Kongo rød er et azofargestoff for proteiner, dannet ved kobling av et diazoniumsalt og en aktiv aromatisk ring. Dette stoffet er i stand til å absorbere elektromagnetisk stråling i det synlige spekteret, og det er derfor det har en intens farge.
Det er negativt ladet. Derfor har den en affinitet for positivt ladede mobilkomponenter, for eksempel visse proteinstoffer. Fargen varierer i henhold til pH. I denne forstand, hvis mediet er surt (< de pH3), el color es azul intenso. Entre pH3 - pH 5,2 es fucsia (zona de viraje), y con >pH 5,2 fargen er dyp rød.
Det er et veldig allsidig stoff, da det har flere bruksområder. Det har blitt brukt som fargestoff i tekstilindustrien, og også til celler og tekstiler.
Også for å utføre kulturmedier som måler enzymatisk virkning, som en pH-indikator, som et kontrollstoff i evalueringen av at spektrofotometre fungerer som de skal, i studiet av dannelse av biofilm, eller i diagnosen amyloid..
På samme måte har det gjort det mulig å skille bakterielle og soppserotyper ved å identifisere spesifikke strukturer i veggen (lipopolysakkarider)..
Artikkelindeks
Dette stoffet ble oppdaget av Böttiger i 1884. Det er et diazoniumderivat dannet av bis-diazoinsyre av benzidin med naftionsyre. Det Kongo-røde molekylet måler 21 Armstrong og molekylvekten er omtrent 8000 g / mol..
Kongorød kjennetegnes ved å være løselig i vann, og enda mer i organiske løsningsmidler som etanol, og danne en kolloid løsning.
Har en affinitet for cellulose, amyloidvev og positivt ladede mobilkomponenter.
Congo Red tilberedes i forskjellige konsentrasjoner avhengig av teknikken som skal brukes. De fleste bruker Kongo rød på blant annet 1%, 2%, 0,1%.
For eksempel, for å tilberede 2% Kongo-rødt, bør 2 g dehydrert matfarge veies opp og 100 ml destillert vann tilsettes. Deretter lagres den i en gul flaske.
For en tid ble det mye brukt i tekstilindustrien på grunn av fiksering på bomull, men for øyeblikket er den i bruk fordi den er kreftfremkallende, og også fordi fargen ikke er stabil, og misfarges av friksjon..
Den biofilmdannende kapasiteten til mikroorganismer har vist seg å være en virulensfaktor.
I denne forstand brukes Kongo rødfargestoff som en metode for å bestemme dannelse av biofilm. Kongorød binder seg til eksopolysakkaridene som er tilstede i biofilmen. Imidlertid, sammenlignet med andre metoder, anbefales det minst på grunn av de høye falske negativene som oppstår.
Metoden bruker Kongo rød agar, denne består av blodagar som base, glukose (10 g / l) og Kongo rødfargestoff (0,4 g / l). Stammene som skal evalueres blir sådd i mediet og inkubert i 24 timer ved 37 ° C, og deretter inkubert i 48 timer ved romtemperatur..
En positiv test er påvist hvis det observeres krystallinske kolonier med svart farge og tørt utseende.
For å vurdere om et absorbans- eller transaksjonsmålingsutstyr er i samsvar med de fotometriske parametrene som er etablert i internasjonale forskrifter, kan en enkel teknikk brukes til å fastslå om utstyret avgir resultater innenfor akseptabilitetsområdet..
En av evalueringsteknikkene er å bruke Kongo-rød, basert på det isosbestic-punktet.
Det isosbestiske punktet er bølgelengden der Kongo-rød avgir samme absorbans uavhengig av pH, konsentrasjon og temperatur. Absorbansverdien er fast og kan brukes som referanse.
Det teoretiske isosbestic-punktet til Kongo-rød er kjent for å være 541 nm. Hvis verdien som oppnås er forskjellig, er det kjent at utstyret har bølgelengdeforstyrrelsesproblemer, og det må kontrolleres av en spesialisert tekniker..
Ortiz et al. Beskriv et kulturmedium tilberedt med Kongo rødt fargestoff og karboksymetylcellulose kalt CMC-agar, for å påvise mikrobielle stammer av cellulitter; det vil si cellulaseprodusenter (endoglukoneser, exoglukanaser og ß-glukosidase).
Dette mediet har en intens fargelegging. Fargen vil bli spredt ved virkningen av endoglukanaseenzymet som bryter strukturen til karboksymetylcellulose. Dette antyder en positiv reaksjon.
Reduksjonen i viskositet og absorbans gjør det mulig å kvantifisere enzymets aktivitet. For eksempel i stammer av Streptomyces sp.
Kongorød har en affinitet for polysakkaridstrukturer av visse stammer, og oppnår identifikasjon av disse mikroorganismer. Blant dem er Escherichia coli, og Shigella flexneri.
Kongo røde agarplater brukes også til å oppnå karakteristiske kolonier, slik det er tilfellet Azospirillum sp, gir skarlagenrøde kolonier, blant andre.
En av de vanligste bruksområdene med Kongo-rød er dens nytte ved diagnosen amyloidose. Denne rare sykdommen består av ekstracellulær akkumulering av et unormalt protein i forskjellige organer. Dette unormale proteinet er laget i benmargen og kalles amyloid..
Kongo-rød har høy affinitet for dette stoffet. Denne egenskapen har blitt brukt for å vise sin tilstedeværelse i histologiske vevssnitt. Congo Red brukes i forbindelse med Hematoxylin / Eosin til dette formålet..
Foreningen av amyloidvevet og Kongo-rødt skjer gjennom ikke-polære hydrogenbindinger, mellom karboksylgruppene og aminogruppen. Amyloidprotein gir karboksylgruppene (COOH) og Kongo rød aminogruppen.
Amyloidvev er farget i forskjellige fargetoner, alt fra rosa til dyprødt under lysmikroskopet. I mikroskoper med dobbelt polarisert lys blir disse preparatene observert med en patognomonisk eplegrønn dobbeltbrytning..
Det vil si at de presenterer dikroisme, siden amyeloidfibrene er anisotrope. Denne observasjonen bekrefter diagnosen.
Vevsfarging med Kongo-rød er kompatibel med andre diagnostiske metoder, for eksempel immuncytokjemiske metoder, og det er til og med mulig å omfarge.
Egenskapen til å snu mot endringer i pH brukes av teknikken som kalles kromoendoskopi..
Denne teknikken bruker fargestoffer og pH-indikatorer som tillater påvisning av visse patologier. Blant dem er bruken av Kongo-rød, som kan avsløre tidlige kreftfokuser i mageslimhinnen, og brukes som en markør for surhet.
Teknikken er basert på at Kongorød ved sur pH er svart. Derfor, etter å ha plassert en løsning av Kongorød på mageslimhinnen, vil områdene der det er blekhet bli valgt for å ta prøven til biopsi, det vil si hvor det ikke er syreproduksjon. Dette antyder tilstedeværelsen av kreftfokus eller tap av parietale celler..
Ingen har kommentert denne artikkelen ennå.