De maismelagar er et fast dyrkningsmedium, med lav næringskraft, nyttig for underdyrking av visse sopper og for demonstrasjon av klamydosporer i stammer av komplekset Candida albicans. På engelsk er det kjent som Corn Meal Agar.
Det konvensjonelle maismelmediet har en veldig enkel sammensetning, det inneholder maismel, agar-agar og vann. På grunn av det lave ernæringsmessige nivået, er det ideelt for bruk i vedlikehold av soppstammer i moderate perioder, spesielt svarte sopp..
Sporulering av komplekset Candida albicans det er foretrukket i dette mediet hvis 1% av Tween 80 tilsettes under fremstilling av agar. Dannelsen av klamydosporer er karakteristisk for denne arten og praktisk talt den eneste som påvirker mennesker..
Det er andre arter som danner klamydosporer, men de påvirker neppe mennesker, for eksempel Candida australis, til stede i pingvin avføring, eller C. clausenii, som er en sjelden funnet saprofyt. På samme måte, unntaks arten C. stellatoidea Y C. tropicalis kunne danne dem.
På den annen side favoriserer tilsetning av glukose til maismelmediet dannelsen av pigmenter i stammer av Trichophytom rubrum.
Det er viktig å merke seg at det er sopp som ikke danner hyfer eller pseudohyfer i maismelagar, som f.eks. Cryptococcus neoformans, skiller seg fra andre sjangre.
Cornmeal agar kan være hjemmelaget i laboratoriet, eller kommersielle medier kan også brukes..
Artikkelindeks
Maismel er substratet, agar er størkningsmidlet, og vann er løsningsmidlet..
Cornmeal agar kan suppleres med tween 80 (sorbitanmonooleat eller polysorbat polyester 80). Denne forbindelsen reduserer overflatespenningen til mediet på grunn av dets emulgerende kraft.
Det skaper også et fiendtlig miljø som hemmer overdreven cellemultiplikasjon og stimulerer veksten av hyfer, og favoriserer også produksjonen av klamydosporer; sistnevnte betraktet motstandsstrukturer. Denne strukturen hjelper til med å identifisere arten av Candida albicans.
For sin del øker glukose i dette mediet den pigmentdannende kapasiteten til noen sopper..
Det skal bemerkes at det middels glukose maismel ikke tjener til å demonstrere klamydosporer i cCandida albicans-kompleks.
Vei ut 47 g gult maismel og oppløs i 500 ml destillert vann. Varm opp til 60 ºC under omrøring av preparatet i en periode på omtrent 1 time. Filtrer deretter gjennom et stykke gasbind og bomull, eventuelt kan det filtreres igjen ved å føre preparatet gjennom et Whatman nr. 2 filterpapir..
Fyll opp volumet til 1000 ml med destillert vann. Tilsett 17 g agar-agar, varme til det er oppløst. Autoklav i 15 minutter ved 121 ºC.
Server i sterile petriskåler. Oppbevares i kjøleskap.
Fargen på det tilberedte mediet er hvitaktig med et klumpete utseende.
Hvis du vil tilberede maismel med glukose i preparatet beskrevet ovenfor, tilsett 10 g glukose.
Vei 17 g av det dehydratiserte mediet og oppløs i 1 liter destillert vann. Blandingen kan varmes opp, ristes forsiktig og oppløses helt. Steriliser i en autoklav ved 121 ºC, ved 15 lb, i 15 minutter.
Hell i sterile petriskåler. La stivne. Snu og oppbevar i kjøleskapet til bruk. Temper før bruk.
PH bør være 6,0 ± 0,2 ved 25 ºC.
For å overholde ISO 18416, må maismelagar tilberedes som følger:
Vei 65 gram per liter og tilsett 10 ml Tween 80. Varm opp og kok i noen minutter til den er oppløst, og pass på å ikke overopphetes for mye. Steriliser ved 121 ºC i 15 minutter.
For å styrke den kromogene kraften til kolonier i Trichophyton rubrum og skille dem fra T. mentagrophytes, 0,2% glukose kan tilsettes den opprinnelige formelen. Du trenger ikke ha Tween 80, da glukose hemmer dannelsen av klamydosporer.
Hovedsakelig er bruken av maismelagar ment for studiet av Candida-stammer, noe som hjelper dem med å identifisere dem gjennom den karakteristiske observasjonen av klamydosporer i albicans-arten. Det vil si at bruken av denne agaren fungerer som en hjelpemetode for identifisering av disse gjærene..
Både saprofytiske og patogene arter kan utvikle seg på denne agaren, men hver danner karakteristiske mycelstrukturer. For eksempel produserer ikke arter av slekten Torulopsis mycelium og reproduserer bare ved blastoconidia..
På samme måte produserer Trichosporon og Geotrichum arter artroconidia på maismelagar, og det er noen ganger vanskelig å skille mellom det ene og det andre..
Arthroconidia av slekten Geotrichum produserer en forlengelse av hyfer som ligner en hockeykule..
Også produksjonen av pigmenter ved bruk av maismelagar supplert med glukose er nyttig i identifiseringen av Trichophytom rubrum.
Mistenkelige Candida-kolonier oppnådd i det primære dyrkningsmediet - Sabouraud agar - fra kliniske prøver, kosmetikk, jord blant annet subkultureres på maismelagar. Mediet blir sådd og inkubert ved 22 ° C i 24 til 48 timer. Inkubasjonstiden kan forlenges om nødvendig.
For dette formålet må maismelagaren med Tween 80 inokuleres ved hjelp av Dalmau-teknikken. Denne metoden består i å ta en del av den mistenkte kolonien med platinahåndtaket og gjøre tre parallelle kutt i midten, og holde håndtaket på 45 °. Kuttene må være atskilt med en avstand på 1 cm fra hverandre.
Deretter plasseres et tidligere flammet dekkgjenstand på stripene som er sådd, slik at halvparten er tildekket og den andre blir avdekket.
Inkuber såplatene ved 30 ° C i 48-72 timer, og undersøk deretter mikroskopisk gjennom dekkglasset..
For vedlikehold av stammer oppbevares såsædsplanter og dyrkede plater i kjøleskap (4 til 8 ºC). På denne måten kan de vare i flere uker og brukes til undervisnings- eller forskningsformål..
For sterilitetskontrollen inkuberes en plate uten inokulering ved romtemperatur, det forventes at det ikke vil være vekst eller fargeendring.
For kvalitetskontroll, kjente stammer som: Staphylococcus aureus, ATCC 6538, Escherichia coli ATCC 25922, Aspergillus niger ATCC 16404, Candida albicans ATCC 1023, Saccharomyces cerevisiae ATCC 9763.
De forventede resultatene er delvis inhibering for S. aureus Y E coli. Mens det forventes tilfredsstillende vekst i resten av stammene.
Aspergillus niger vokser med svarte og sporulerte kolonier i en omtrentlig tid på 5 dagers inkubasjon.
Candida albicans gjærkolonier med klamydosporeproduksjon.
Saccharomyces cerevisiae produsere store gjærceller.
Det dannes et gult bunnfall på bunnen av platen som ikke skal forveksles med kolonier..
Ingen har kommentert denne artikkelen ennå.