De isolering av mikroorganismer innebærer et sett med teknikker som brukes til å ekstrahere og skille artene av mikrober av interesse fra deres naturlige habitat til et habitat in vitro. Disse teknikkene er et sett med mange grunnleggende og nødvendige verktøy for mikrobiologiske studier..
De fleste av mikroorganismene som er kjent og som er definert av vitenskap, er de som har vært i stand til å bli isolert og oppbevart i beholdere som delvis simulerer de indre forholdene til stedene de bor..
Kanskje en av de første mennene som praktiserte isolasjonen av mikroorganismer, var Anton Van Leeuwenhoek (1632-1723), som samlet og isolerte prøver av mikrober fra et stort antall steder og økosystemer for å observere dem nøye under hundrevis av mikroskoper som han designet..
Det var imidlertid ikke før forskerne Louis Pasteur og Robert Koch i løpet av 1800-tallet begynte å utføre streng praksis som tjente til å isolere spesifikke mikroorganismer, alt for å kunne studere dem i detalj..
I motsetning til Leeuwenhoek fokuserte disse forskerne på å isolere definerte arter fra de andre artene av mikrober i miljøet. I tillegg var de interessert i å holde dem i live så lenge som mulig utenfor sitt naturlige miljø..
For tiden er det utviklet presise teknikker for isolering og vekst av mange forskjellige mikroorganismer oppnådd fra nesten ethvert miljø på biosfæren..
Artikkelindeks
Alle mikroorganismeisolasjoner begynner med å samle inn en prøve i naturen der mikroorganismer av interesse er funnet. Disse stedene kan være sår i dyre- eller plantevev, jord eller underlag, sølepytter, hav, overflater som hud osv..
Prøvetakingen utføres ved å berøre eller støtte en beholder som har et medium med passende krav til vekst av mikroorganismer på overflaten som det er ønskelig å isolere fra. I denne beholderen får du det som er kjent som en "kultur" av mikrober..
Generelt er den første avlingen som oppnås fra naturlige habitater utvilsomt en "blandet avling", det vil si den består av et stort antall forskjellige arter av mikrober..
Imidlertid kan de fleste arter av mikroorganismer isoleres fra hverandre i laboratoriet for å oppnå mikroorganismekulturer der bare arten av interesse vokser eller, med andre ord, oppnå "rene kulturer".
I hovedsak er prosessen som utføres for å oppnå "rene kulturer" det som er kjent som "isolering av mikroorganismer".
Det er et stort antall teknikker for isolering av mikroorganismer, og det er til og med noen spesifikke for en bestemt type mikroorganisme spesielt. I andre tilfeller er det mulig å oppnå en ren kultur bare ved å samle prøven fra det naturlige miljøet..
Blant isolasjonsteknikkene som er mest brukt for å skille en art av interesse som finnes i blandede kulturmedier, er:
Kanskje dette er den mest brukte metoden for å isolere mikroorganismer. Denne teknikken består i å fremstille et sterilt fast medium med alle de ernæringsmessige forbindelsene som er nødvendige for vekst av mikroorganismen i en glassbeholder, for eksempel en petriskål..
Ved å bruke et fint, generelt spiss instrument berøres mikroorganismen som skal isoleres i den blandede kulturen, og i det sterile faste mediet begynner spissen av instrumentet som mikroorganismen ble berørt med å gli fra side til side gjennom hele bilskilt.
Dette gjøres intensivt frem og tilbake over overflaten av det faste eller agariserte mediet, som om det var en sikksakk. Dette gjøres vanligvis til omtrent en tredjedel av diameteren på agaren på platen er dekket..
For denne metoden utføres en fortynning av mediet der de innsamlede mikroberne lever til det punktet hvor det bare er noen få hundre celler igjen for hver milliliter av mediet der de ble fortynnet..
Fra denne fortynningen tas noen milliliter og blandes med mediet som skal tilsettes i beholderen før den stivner. Når det blir laget en blanding mellom det agariserte mediet og det flytende mediet der mikroorganismene er, forblir de nedsenket i mediet og er bare synlige til de sprer seg i form av en koloni..
Etter hvert som de utvikler seg som en koloni, blir det lettere å skille dem fra resten av mikroorganismer med andre metoder som riper, for eksempel.
Denne metoden består i å lage serielle fortynninger av mediet der mikroorganismene finnes. Et eksempel på dette er fortynningene som er laget for å rense Lactococcus lactis eller Lactobacillus acidophilus, bakterier som er ansvarlige for produksjonen av ost og yoghurt.
Omtrent 1 milliliter er hentet fra et rør som inneholder sur melk eller tidligere gjæret yoghurt, og denne milliliter inokuleres i steril melk uten mikroorganismer. Senere tas omtrent en milliliter av melken og prosessen gjentas.
Dette gjentas omtrent tre eller fire ganger på rad, noe som sannsynligvis oppnås Lactococcus lactis eller Lactobacillus acidophilus i et medium isolert fra forurensninger som kan representere andre mikrober.
Denne metoden oppnås ved å dyrke mikroorganismer i kulturmedier med forhold som stimulerer eller letter veksten av arten av interesse og i mange tilfeller under forhold som hemmer veksten av andre forurensende mikroorganismer..
Bakterier av slekten Salmonella De vokser i kulturmedier beriket med selenitt, siden disse mikroorganismene forvandler selenitt til selen for å metabolisere det. Selenitten i mediet gjør det vanskelig å assimilere næringsstoffene til andre mikroorganismer enn salmonella..
Kanskje dette er den vanskeligste og minst effektive teknikken for å isolere mikrober. Det innebærer å plassere en dråpe av mediet (prøven) der mikroorganismene er plassert på et sterilt dekkglass, og deretter plassere det på mikroskopstadiet..
Senere, mens du observerer, fjernes en enkelt celle ved hjelp av en steril mikropipette. Dråpen plasseres på et annet sterilt dekkglass som inkuberes ved passende temperatur for mikroorganismen. Til slutt observeres det igjen under mikroskopet for å vise veksten.
Hvis nye celler har utviklet seg fra enkeltcellen tatt på ny observasjon, blir de lagt til et sterilt dyrkningsmedium for å oppnå en fullisolert ren kultur..
Det er utallige forskjellige mikrober på planeten Jorden som er spredt over nesten alle kjente økosystemer. Noen mikroorganismer er kjent som ekstremofiler og krever unike forhold for utvikling og vekst..
Disse ekstreme forholdene er både fordelaktige og ufordelaktige for isolasjon, ettersom de, selv om de bare tillater vekst av disse mikroorganismer, kan være vanskelige å gjenskape in vitro.
Isolering av mikroorganismer har representert en av de viktigste fremskrittene innen vitenskap og medisin. Dette har gjort det mulig for menneskeheten å studere og utvikle effektive behandlinger mot forskjellige mikrobielle patogener..
For øyeblikket er det kjent med sikkerhet at mikroorganismer utgjør en viktig del av alle økosystemer, slik at det å oppnå isolering av noen av dem med relativ betydning for mennesket, gjør det mulig for forskere å studere dem intensivt, for å forstå dybden sin rolle i hvert økosystem..
Ingen har kommentert denne artikkelen ennå.