De bakteriologisk sløyfe Det er et arbeidsinstrument som brukes av mikrobiologer til såing av mikrobielle kulturer (bakterier eller sopp). Det er kanskje det instrumentet som brukes mest av disse fagpersonene.
Bruken av den virker enkel, men i virkeligheten krever den mye trening. Før du begynner å så, må sløyfen steriliseres i Bunsen-brenneren, deretter tas det mikrobielle inokulatet som kan komme fra en flytende kultur eller en fast kultur..
Når inokulatet er tatt, kan det avsettes i et flytende medium eller sås i et fast medium. Etter hver prosedyre blir sløyfen sterilisert igjen. Håndtaket tjener også til å lage mikrobielle flekker på et lysbilde.
Den bakteriologiske sløyfen har mange navn, inkludert: platina-sløyfe eller -sløyfe, inokuleringssløyfe eller såingsløyfe, men dens virkelige navn er Kohle-sløyfe..
Materialet som håndtaket er laget med er generelt en nikkel-kromlegering (nikrom) eller også platina. Et annet utvalg som er tilgjengelig på markedet er bakteriebåndsløyfene til engangsbruk..
På den annen side er det flere typer bakteriologiske sløyfer, hver utfører en funksjon innenfor oppgavene utført av en mikrobiolog. Valg av håndtak vil avhenge av hva som må gjøres.
For eksempel, for å utføre et striatum på grunn av utarmning for å isolere en mikroorganisme, brukes platinsløyfen som ender i en lukket ring, uavhengig av om den er kalibrert eller ikke..
Mens det er å så en urinprøve, der det er viktig å tallfeste CFU, er det nødvendig å bruke den kalibrerte sløyfen. På samme måte er nålesløyfen viktig for å inokulere biokjemiske tester som krever såing ved punktering. Det er viktig at håndtaket håndteres av opplært personell.
Artikkelindeks
Bakteriologiske sløyfer består av to ekstremer. Den ene enden tilsvarer håndtaket eller basen, mens den andre er selve håndtaket.
Basen tjener til å gripe håndtaket under håndtering. Det er vanligvis metallisk, men har en varmeisolator for å forhindre at operatøren blir brent når tuppen av håndtaket blir sterilisert på tenneren. Den måler omtrent 20 cm, selv om den kan være lengre. Den har en tråd for å justere håndtaket.
Det er den funksjonelle enden, det vil si den delen som kommer i kontakt med mikroorganismer og med kulturmediene. Den består av en fin ledning som settes inn i basen.
Håndtaket kan være laget av nikrom eller platina, derfor kalles det noen ganger et platinahåndtak. Den er ca. 6,5 cm lang og har en måler på ca. 0,20 mm. Håndtaket med håndtaket kan måle 26,5 cm. Målingene kan variere fra produsent til produsent.
Det finnes flere typer bakteriologiske sløyfer, og hver har en spesifikk bruk. Håndtakstyper er som følger: kalibrert ringformet håndtak, ikke-kalibrert ringformet håndtak, rett eller nålehåndtak, spatulert håndtak, “L” -formet håndtak og skarpt håndtak.
På den annen side kan håndtakene være permanente eller engangsbruk. De til permanent bruk steriliseres i tenneren, er gjenbrukbare og veldig holdbare. Mens engangsartikler er sterile fra fabrikken, brukes de bare en gang og kastes..
Det er det mest brukte håndtaket i mikrobiologilaboratoriet. Det brukes til å ta et inokulum fra en mikrobiell suspensjon (flytende medium) eller en del av kolonien (fast medium) som skal podes i et annet kulturmedium, enten en biokjemisk test eller et mer beriket eller selektivt medium, alt etter omstendighetene . Også nyttig for å lage mikrobielle utstryk på et lysbilde.
Med denne typen sløyfe kan det første inokulatet strekes. Den er også designet slik at den glir jevnt på agaren uten å skade den. Selvfølgelig krever dette et opplært personale til å håndtere såteknikken, bruke riktig kraft og bevegelser for å gjøre en god striering..
Med dette håndtaket kan forskjellige såteknikker utføres. Eksempel, faste medier i petriskåler blir vanligvis sådd av utmattelse (det er flere teknikker, se video 1).
Denne teknikken tar sikte på å oppnå isolerte kolonier for å kunne studere og identifisere dem, spesielt når prøven er polymikrobiell, det vil si at kulturen ikke er ren (den inneholder mer enn en type mikroorganisme)..
I stedet plantes kilene i en enkel sikksakk for å oppnå bakteriemasse, og i dette tilfellet er det ikke nødvendig å isolere kolonier..
Noen ganger brukes de også til å ta visse prøver. For eksempel Rojas et al. Brukte den bakteriologiske sløyfen til å samle skrapede vaginale vevsprøver fra rotter..
Dette håndtaket, som navnet antyder, er kalibrert for å ta en bestemt mengde mikrobiell suspensjon. Den brukes når det er nødvendig for inokulatet å overholde det som er standardisert i teknikken.
For eksempel er det veldig vanlig å plante urinkulturer. I dette tilfellet kan en kalibrert sløyfe på 0,01 ml og en på 0,001 ml brukes..
Det skal bemerkes at kalibrerte håndtak har en feilmargin, som varierer i henhold til vinkelen som prøven tas med og størrelsen på beholderens munn..
Hvis 0,001 ml håndtak settes vertikalt i en beholder med liten munn (≤ 7 mm), vil mengden som tas, være 50% mindre enn ønsket.
Dette skjer fordi jo mindre diameteren på beholderens munn er, jo høyere overflatespenning og derfor øker heftkreftene mellom (glass - væske). Dette fører til at væskelasten som tas av håndtaket blir mindre.
Mens det tas i en vinkel på 45 ° i en beholder med bred munn (≥ 22 mm), kan 150% mer enn den nødvendige mengden samles opp. I dette tilfellet er overflatespenningen lavere og kohesjonskreftene i glass / plast reduseres, mens kohesjonskraften mellom væske og væske øker..
På grunn av det ovennevnte foretrekkes noen ganger andre metoder for kvantifisering av kolonidannende enheter for urinkulturer..
Det kalles også et trådhåndtak. Den brukes til å inokulere visse biokjemiske tester, spesielt de som må podes med punkteringsteknikken. Eksempel på halvfaste medier som er fremstilt i form av en blokk, slik som: SIM-medium, MIO og O / F.
I tillegg, i tilfelle av MIO og SIM som evaluerer motilitet, er det viktig at punktering utføres med en nålesløyfe, siden tolkningen av en positiv motilitet oppstår når bakteriene vokser mot sidene av det første inokulatet..
En test inokulert med en loop loop kan forfalske resultatene (falske positive). Av denne grunn, i denne typen såing, må du passe på at punktering er unik, og at når du fjerner den, kommer den ut i samme retning den gikk inn.
En annen test som skal nåles, selv om den er tilberedt i en kileform, er Kligler. I denne testen anbefales det ikke at oksygen trenger inn i agaren, ettersom det kreves et oksygenfattig medium for at visse kjemiske reaksjoner skal oppstå. Dette håndtaket brukes også til å berøre en bestemt koloni for å subkulturere.
De fleste mikroorganismer gir myke, lett å kaste kolonier. Imidlertid er det noen mikrobielle midler hvis kolonier er harde og tørre, for eksempel mykobakterier generelt og noen sopp. I disse tilfellene er det nyttig å bruke spatulehåndtaket.
Den hyppigste bruken er å ringe soppkulturer, spesielt mugg..
Det er nyttig for å ta svært små kolonier i polymikrobielle kulturer for å kunne subkulturere dem.
Håndtaket må steriliseres før og etter bruk. For å sterilisere den bakteriologiske sløyfen i tenneren, gjør du som følger: håndtaket skal plasseres på toppen av flammen og innta en posisjon så loddrett som mulig, slik at den steriliseres fra spissen og oppover..
Når det fine filamentet blir knallrødt, kan det sies å være sterilt. For å bruke den, blir den avkjølt og den valgte prøven tas. (Se video 2).
Ingen har kommentert denne artikkelen ennå.