De kromatogram er en todimensjonal grafisk registrering oppnådd på et absorberende medium, som viser separasjonen av stoffer ved kromatografi. Et synlig mønster, topper eller flekker, dannes på kromatogrammet, som gjenspeiler den fysiske separasjonen av komponentene i en blanding.
Den nedre figuren er et kromatogram med tre topper, A, B og C, av tre komponenter i prøven atskilt med kromatografi. Det observeres at hver av de tre toppene har forskjellig høyde og plassering på kromatogrammets tidsakse..
Ordinaten eller Y-aksen registrerer informasjon om signalets intensitet (i millivolt mV i dette tilfellet). Representerer registreringen, avhengig av detektoren, av stoffets fysiske egenskap eller den separate komponenten av blandingen.
Høyden på toppen er proporsjonal med konsentrasjonen av komponenten atskilt fra prøven i et optimalt system. Dermed er det for eksempel enkelt å visualisere at komponent B finnes i en høyere andel enn A og C.
På abscissa- eller X-aksen er retensjonstiden for komponentene i prøven eller blandingen representert. Det er tiden som går fra injeksjonen av prøven til den stopper, og er forskjellig for hvert rent stoff.
Artikkelindeks
Det er den endelige registreringen av hele kromatografiprosessen. Parametere som er av analytisk interesse hentes fra den. Dette kan fås som en elektronisk fil, et trykt histogram eller på prosessmediet; på papir, for eksempel.
Y-aksen genereres av signal- eller intensitetsresponsdetektorer, for eksempel spektrofotometre. En optimal analyse av tiden, av karakteristikkene til toppene eller flekkene som er oppnådd, er viktig; størrelse, plassering, farge, blant andre aspekter.
Kromatogramanalyser krever generelt bruk av kontroller eller standarder, stoffer med kjent identitet og konsentrasjon. Analysen av disse kontrollene gjør det mulig å fastslå ved sammenligning med de karakteristiske prøvene til komponentene i den undersøkte prøven.
I kromatogrammet kan observasjon og analyse av hvordan separasjonen av komponentene i en blanding ble utført utføres. Den optimale studien gjør det mulig å identifisere et stoff, demonstrere dets renhet, kvantifisere mengden stoffer som er tilstede i en blanding, blant andre aspekter.
Informasjonen hentet kan være kvalitativ; for eksempel når stoffer identifiseres og deres renhet bestemmes. Kvantitativ informasjon vedrører bestemmelse av antall komponenter i blandingen og konsentrasjonen av den separerte analytten..
Ved å analysere resultatene av kromatogrammet kan forskjellige stoffer identifiseres ved å sammenligne retensjonstidene med kjente stoffer. Det kan observeres om stoffene som studeres reiser samme avstand hvis de har samme tid som de kjente stoffene.
For eksempel kan kromatogrammet oppdage og identifisere metabolitter av legemidler som sentralstimulerende midler og steroider i urinen til idrettsutøvere. Det er en viktig støtte i studien og forskningen av noen metabolitter produsert av genetiske lidelser hos det nyfødte.
Kromatogrammet letter deteksjonen av halogenerte hydrokarboner som er tilstede i drikkevann, blant andre stoffer. Det er viktig i kvalitetskontroll laboratorieanalyser, siden det gjør det mulig å oppdage og identifisere forurensninger som finnes i de forskjellige produktene.
I et kromatogram kan du skille mellom rene og urene stoffer. En ren substans ville produsere en enkelt topp på kromatogrammet; mens et urent stoff ville produsere to eller flere topper.
Ved å justere forholdene der kromatografien utføres riktig, kan to stoffer forhindres i å danne en enkelt topp..
Ved å analysere topparealet til kromatogrammet kan konsentrasjonen av prøvekomponentene beregnes.
Derfor er toppområdet areal proporsjonalt med mengden av stoffet som er tilstede i prøven. Disse kvantitative dataene er oppnådd i høysensitive systemer, for eksempel de som genereres av gass eller væskekromatografi, for eksempel.
En av klassifiseringene av kromatogrammer er nært beslektet med de forskjellige typene kromatografi, som genererer det tilsvarende kromatogrammet..
Avhengig av driftsforholdene, vil detektorene, blant annet, kromatogrammet variere i innhold og kvalitet..
Kromatogrammet kan genereres direkte på papir eller tynt lag, og viser direkte fordelingen eller fordelingen av komponentene i prøven.
Det er veldig nyttig for separasjon og studier av fargede stoffer som har naturlige pigmenter, som klorofyll. Det kan bli utsatt for utviklingsprosesser i tilfelle stoffene ikke har naturlig farge, og det er nyttig for kvalitative studier.
Kromatogrammet kan også fås ved hjelp av en detektor som registrerer respons, utgang eller endelige signal fra kromatografien. Som nevnt tidligere er denne detektoren vanligvis et spektrofotometer, et massespektrometer, automatiske sekvenserere, elektrokjemikalier, blant andre..
Kromatogrammer generert i kolonner, enten av gasser eller væsker, så vel som de med høy oppløsning i tynne lag, bruker detektorer.
Avhengig av type detektor kan kromatogrammet klassifiseres i differensial eller integrert, avhengig av detektorens responsform..
En differensialdetektor måler kontinuerlig responssignalet fra kromatogrammet, mens integrerte detektorer kumulativt måler det tilsvarende signalet.
Et differensialkromatogram er et kromatogram oppnådd av en differensialdetektor. Disse detektorene inkluderer for eksempel spektrofotometre og detektorer for endringer i elektrisk ledningsevne..
Denne typen kromatogram har vist resultatet av separasjonen av anioner fra en prøve, oppdaget ved indirekte fotometri. De samme resultatene er også oppnådd for studier av ioner, for eksempel med endelig påvisning ved kondimetri..
Den øvre grafen viser eksemplet på et differensialkromatogram, oppnådd ved hjelp av automatiske DNA-sekvenser (deoksyribonukleinsyre). Grafen viser tydelig topper i fire farger, en farge for hver av de nitrogenholdige basene i DNA..
Gjennom støtte fra et datastyrt program, blir tolkningen av sekvensen av basene til det analyserte DNAet tilrettelagt, så vel som for mer komplekse analyser.
Det integrerte kromatogrammet tilsvarer det som oppnås av en integral detektor. Dette kromatogrammet viser utdataene fra en enkelt komponent som studeres. Flere topper oppnås ikke som i differensialet.
I det integrerte kromatogrammet oppnås en registrering med en form som er beskrevet som et trinn. Denne formen er den delen av kromatogrammet som tilsvarer mengden av et enkelt stoff som forlater kolonnen..
Ingen har kommentert denne artikkelen ennå.