Cary Blair Medium begrunnelse, forberedelse og bruksområder

4319
Anthony Golden

De halvparten Cary Blair er en halvfast agar, brukt til transport og konservering av biologiske prøver som inneholder tarmpatogener, labile og anaerobe mikroorganismer. Som ethvert transportmiddel, er dens funksjon å holde prøven i optimale forhold til den blir dyrket. De tilstedeværende patogene mikroorganismer, så vel som den medfølgende mikrobiotaen, må forbli levedyktig, men uten å øke befolkningen..

Cary Blair Medium er resultatet av formuleringsendringen av Stuart Transport Medium. Modifiseringen ble utført i 1964 og besto av å erstatte pH-reguleringssystemet (glyserofosfat) med en uorganisk fosfatbuffer..

A. Culturette med Cary Blair Medium B. Krakkesamler med Cary Blair Medium. Kilde: A. Video Meganhow, få en sårkultur 2011 youtube.com B. Bruker: Mattes [Public domain]

Omformuleringen var nødvendig fordi skaperne skjønte at glyserofosfat etter en viss tid kunne metaboliseres av noen saprofytiske bakterier. Disse overlapper hverandre de tilstedeværende patogenene.

Andre endringer var eliminering av metylenblått, samt en justering av pH mot alkalinitet (pH 8,4). Alle disse endringene forbedret effektiviteten til transportmidlene.

Opprinnelig ble Cary Blair-mediet brukt til vedlikehold av tarmpatogener, som f.eks Shigella flexneri, Salmonella sp, Vibrio cholerae og Campylobacter sp.

Senere har man imidlertid sett effekten av å bevare levedyktigheten til krevende og labile patogene mikroorganismer, slik som: Neisseria gonorrhoeae, Haemophilus influenzae, Neisseria meningitidis, Bordetella pertussis, Streptococcus pneumoniae og noen anaerober.

Artikkelindeks

  • 1 Begrunnelse
  • 2 Klargjøring
  • 3 Bruk
    • 3.1 Type prøver
    • 3.2 Prøveinnsamling
    • 3.3 Identifikasjon av prøven
    • 3.4 Overføring
  • 4 Undersøkelser utført på transportmidlet Cary Blair
  • 5 Kvalitetskontroll
  • 6 Referanser

Basis

Cary Blair Medium inneholder natriumklorid, natriumtioglykolat, dinatriumfosfat, kalsiumklorid og agar.

Natriumklorid opprettholder den osmotiske balansen i mediet, dinatriumfosfat og kalsiumklorid balanserer pH. På sin side opprettholder natriumtioglykollat ​​et lavt oksidasjonsreduksjonspotensial, mens den lille delen av agar gir den halvfaste konsistensen..

Cary Blair-medium inneholder ikke næringsstoffer, siden transportmediets funksjon er å opprettholde prøven uten at den gjennomgår endringer når det gjelder fuktighet og mikrobiell belastning; det vil si at det unngår dehydrering av prøven samtidig som levedyktigheten og mengden av tilstedeværende mikroorganismer bevares.

Til slutt forhindrer den litt alkaliske pH at mikroorganismer dør av surhet, spesielt Vibrios er veldig følsomme for syrer.

Forberedelse

Cary Blair media er kommersielt tilgjengelig som en spesiell klar til bruk-enhet. Transportsystemet dekkes av en Peel Pack-pose i plast. Inne i den inneholder en vattpinne for å samle prøven og beholderrøret for Cary Blairs halvfast medium..

Også i markedet er det kommersielle hus som leverer det dehydratiserte mediet for tilberedning i laboratoriet..

For å gjøre dette må du veie 13,2 g av det dehydratiserte mediet og oppløse det i en liter destillert vann. Varm opp og rist preparatet til det er helt oppløst. Fordel mediet i skruelokkede prøverør (bakelitt).

Damp rørene i 15 minutter. La avkjøles og oppbevares ved romtemperatur til bruk.

Uinokulert Cary Blair-medium kan lagres optimalt i opptil 18 måneder ved romtemperatur.

Mediumets pH må justeres til 8,4 ± 0,2. Fargen på det tilberedte mediet er beige, med litt uklarhet.

Bruk

Type prøver

Cary Blair Medium brukes når prøver på avføring, rektal vattpinne og vaginal vattpinne ikke kan behandles umiddelbart.

Når ingen transportmidler er tilgjengelige, kan prøvene oppbevares ved -70 ° C.

Prøvetaking

Pinnen er impregnert med prøven, og den føres inn i Cary Blair-mediet uten å nå bunnen.

Eksempelidentifikasjon

Cary Blair-mediet må ha en etikett der grunnleggende data er plassert, for eksempel: pasientens for- og etternavn, prøveens identifikasjonsnummer, kilde til prøveinnsamlingen, behandlende lege, dato og klokkeslett for prøven. , presumptiv diagnose, antibiotikabehandling.

Overføre

Tett dekket og transportert ved romtemperatur for fekale prøverFor vaginale prøver på jakt etter anaerobe mikroorganismer, anbefales det å transportere prøvene ved 4 ° C.

I alle tilfeller er anbefalt overføringstid 4-6 timer, med maksimalt 24 timer..

Hvis tilstedeværelsen av Campylobacter jejuni i avføringsprøver, og disse kan ikke behandles innen 24 timer, anbefales lagring i Cary Blair-medium ved 4 ° C.

Forskning utført på Cary Blair transportmiddel

Flere studier har vist at Cary Blair-medium kan forbli levedyktig for enteropatogene mikroorganismer av slekten Shigella og Salmonella i opptil 49 dager etter at prøven er tatt..

For sin del, Vibrio cholerae, et annet viktig tarmpatogen, er i stand til å overleve i 22 dager, mens Yersinia pestis (forårsakende middel for luft- og lungepest) kan gjenopprettes etter 75 dager.

Til tross for påvist holdbarhet når det gjelder utvinning av disse mikroorganismene, anbefales det imidlertid at prøvene som tas blir transportert i Cary Blair-mediet til laboratoriet så raskt som mulig..

Når prøven når laboratoriet, må den sås uten forsinkelse i de respektive kulturmediene..

På den annen side anbefales Cary Blair-mediet, i tillegg til å være nyttig for transport av fakultative mikroorganismer, også for prøver som inneholder anaerobe patogener..

I denne forstand utførte DeMarco og samarbeidspartnere i 2017 en studie med tittelen: Overlevelse av vaginale mikroorganismer i tre kommersielt tilgjengelige transportsystemer.

De demonstrerte at Cary Blair Transport Medium er det beste transportmediet for bevaring og utvinning av vaginale anaerobe mikroorganismer. På samme måte viste de at den høyeste utvinningsgraden ble oppnådd når overføringstemperaturen var 4 ° C..

Derfor konkluderes det med at transporttemperaturen for vaginale vattpinner (anaerobe mikroorganismer) skal være ved 4 ° C. Mens det er fekale prøver som leter etter fakultative mikroorganismer, er den ideelle temperaturen romtemperatur..

QA

Stammer kjent som Shigella sonnei ATCC 11060, Salmonella choleraesuis  ATCC 14028, Vibrio cholerae Y Campylobacter sp.

Mediet inokuleres med den valgte stammen og holdes ved romtemperatur i 24 timer. De blir sådd i tilsvarende kulturmedier. I alle tilfeller forventes en tilfredsstillende utvinning av den aktuelle mikroorganismen..

Referanser

  1. DeMarco AL, Rabe LK, Austin MN, et al. Overlevelse av vaginale mikroorganismer i tre kommersielt tilgjengelige transportsystemer. Anaerobe. 2017; 45: 44-49.
  2. Wasfy M, Oyofo B, Elgindy A, Churilla A. Sammenligning av konserveringsmedier for lagring av avføringsprøver. J Clin Microbiol. nitten nitti fem; 33 (8): 2176-2178.
  3. Dan M, Richardson J, Miliotis MD, Koornhof HJ. Sammenligning av konserveringsmedier og frysebetingelser for lagring av avføringsprøver. J Med Microbiol. 1989; 28 (2): 151-4.
  4. Koneman E, Allen S, Janda W, Schreckenberger P, Winn W. (2004). Mikrobiologisk diagnose. 5. utg. Redaksjonell Panamericana S.A. Argentina.
  5. Forbes B, Sahm D, Weissfeld A. (2009). Bailey & Scott mikrobiologisk diagnose. 12. utg. Redaksjonell Panamericana S.A. Argentina.
  6. Conda Pronadisa Laboratories. Half Cary Blair. Tilgjengelig på: condalab.com
  7. Metrix Laboratory. Cary Blair. Tilgjengelig på: metrixlab.mx

Ingen har kommentert denne artikkelen ennå.