Antistreptolysin O-kvantifisering, begrunnelse, teknikk, patologier

1297
Alexander Pearson

De antistreptolysin O er antistoffet som genereres som respons på en infeksjon forårsaket av bakteriene Streptococcus pyogenes eller også kjent som gruppe A beta-hemolytisk streptokokk, som produserer to typer eksotoksiner med hemolytisk aktivitet kalt “S” og “O” streptolysiner..

Streptolysin S er ansvarlig for beta-hemolyse som forekommer i blodagar, og selv om den er giftig for visse celler i immunsystemet, er den ikke antigen. Mens streptolysin O, som er labilt mot oksygen, er ansvarlig for hemolysen som oppstår under blodagaren, og dette er antigent.

Streptococcus pyogenes / Diagram over hva som skjer i ASTO-testen (agglutinasjonsreaksjon). (Antistoffer bundet til latexpartikler som inneholder det spesifikke antigenet). Kilde: Bruker: Graham Beards [CC BY-SA 3.0 (https://creativecommons.org/licenses/by-sa/3.0))] / Alejandro Porto [CC BY-SA 3.0 (https://creativecommons.org/licenses / by-sa / 3.0)]

Derfor, når cellene i immunsystemet samhandler med streptolysin O, produseres en spesifikk immunrespons som genererer aktivering av B-lymfocytter. Disse cellene produserer antistoffer rettet mot streptolysin O. Derfor kalles antistoffene antistreptolysin O.

De Streptococcus pyogenes produserer forskjellige patologier, blant annet: betennelse i mandlene, erysipelas, impetigo, fødselsfeber, skarlagensfeber og septikemi. Antistreptolysin O-antistoffer vises 8 til 30 dager etter infeksjonsstart.

De fleste av disse infeksjonene er svært vanlige i befolkningen, så det er vanlig at folk har antistreptolysin O-antistoffer i blodet. Lavtiter indikerer en tidligere infeksjon med denne bakterien, men en høy eller stigende titre indikerer en nylig eller pågående infeksjon..

Artikkelindeks

  • 1 Kvantifisering av antistreptolysin O-antistoffer
  • 2 Bakgrunn for ASTO-teknikken
  • 3 teknikker
    • 3.1 - Semikvantitativ teknikk
    • 3.2 - Kvantitativ teknikk
  • 4 Patologier med høye titre av antistreptolysin O
    • 4.1 Post streptokokk autoimmune sykdommer
  • 5 Referanser

Kvantifisering av antistreptolysin O-antistoffer

I laboratoriet kan antistreptolysin "O" antistofftiter måles gjennom en serologisk test. Antistreptolysin O (ASTO) -testen er basert på en agglutinasjonsreaksjon med latex.

Det kan gjøres halvkvantitativt, rapportering i kryss eller titer kan også kvantifiseres. Det er normalt og ikke signifikant å finne verdier opp til 200 IE / ml eller Todd-enheter / ml. Over denne verdien anses den som positiv og er klinisk signifikant..

Denne testen krever ikke at pasienten skal faste. Serum brukes som en prøve, det vil si at pasientens blod ekstraheres og plasseres i et rør uten antikoagulant, deretter sentrifugeres det for å oppnå serum.

ASTO teknikkgrunnlag

Teknikken bruker latexpartikler som støtte for å fiksere streptolysin O-antigenet. De absorberte antigenpartiklene reageres med pasientens serum. Hvis pasienten har antistreptolysin O-antistoff, vil disse binde seg til antigenet som er festet til latexpartikkelen.

Denne bindingen forårsaker agglutinasjon som er makroskopisk synlig. Reaksjonens intensitet er direkte proporsjonal med konsentrasjonen av antistoffer som er tilstede.

Teknikker

- Semikvantitativ teknikk

Intensiteten til reaksjonen kan kvantifiseres i kryss. For å gjøre dette tas en serologisk reaksjonsplate og plasseres:

50 ul serum og 50 ul ASTO-reagens. Bland godt med en tannpirker av tre og legg i en automatisk mikser i 2 minutter. Se. Hvis en automatisk rotator ikke er tilgjengelig, må den gjøres manuelt.

Tolkning

Klumpfri suspensjon (uniform): negativ

1. + = svak reaksjon

2. ++ = liten reaksjon

3. +++ = moderat reaksjon

4. ++++ = sterk reaksjon

Sera som er positive med 3 og 4 kryss kan kvantifiseres.

- Kvantitativ teknikk

For kvantifisering av titeren blir seriefortynninger 1: 2, 1: 4: 1: 8, 1:16 laget..

For å gjøre dette, gjør følgende: 4 prøverør eller Kahn-rør tas og 0,5 ml fysiologisk saltvann legges på dem alle. Deretter tilsettes 0,5 ml pasientserum til det første røret. Det blander seg godt. Det røret tilsvarer fortynningen 1: 2.

Deretter overføres 0,5 ml til rør 2 og blandes godt. Dette røret tilsvarer fortynningen 1: 4 og så videre til ønsket fortynning er nådd.

Ta 50 ul av hver fortynning og reager med 50 ul ASTO-reagens på en agglutinasjonsplate, som forklart i den semi-kvantitative teknikken..

Tolkning

Den høyeste fortynningen der man observerer synlig agglutinasjon blir tatt i betraktning. Beregningene utføres som følger:

ASTO = Invers av høyest positiv fortynning x teknikkfølsomhet (konstant).

Eksempel: Pasient med positiv reaksjon opp til 1: 8

ASTO = 8 x 200 IE / ml = 1600 IE / ml eller Todd Enheter / ml.

Referanseverdi

Normal voksen: opptil 200 IE / ml

Normale barn: opptil 400 IE / ml

anbefalinger

Det anbefales å montere en positiv og en negativ kontroll med pasientene for å sikre at reagenset er i optimal tilstand. Hvis den positive kontrollen ikke agglutinerer eller den negative kontrollen agglutinerer, kan reagenset ikke brukes..

Reaksjonen må tolkes etter 2 minutter, etter denne tiden er den ikke gyldig hvis det er agglutinasjon. Det handler om falske positive.

Hyperlipemiske sera forstyrrer reaksjonen. De kan gi falske positive.

En isolert ASTO-verdi er ikke til stor hjelp. Det må ledsages av symptomene.

I tillegg anbefales det å utføre minst 2 ASTO-målinger når det er mistanke om revmatisk feber eller post-streptokokk glomerulonefritt, dette for å demonstrere økningen i antistreptolysin O nivåer og dermed bekrefte diagnosen..

Patologier med høye titre av antistreptolysin O

Anti-streptolysin antistoffer økes etter å ha fått en infeksjon av Streptococcus pyogenes o Gruppe A ß-hemolytisk streptokokk.

Disse inkluderer: akutt faryngitt, skarlagensfeber, impetigo, erysipelas, fødselsfeber og septikemi.

Noen pasienter som har fått nylig eller tilbakevendende streptokokkinfeksjoner, kan utvikle autoimmune sykdommer som en følge eller komplikasjon av post-streptokokkinfeksjon, som akutt glomerulonefritt og revmatisk feber..

Post streptokokk autoimmune sykdommer

Revmatisk feber

Det er en inflammatorisk komplikasjon eller følgesykdom som kan oppstå 1 til 5 uker etter å ha fått en streptokokkinfeksjon. Antistreptolysin O-titere øker betydelig 4 til 5 uker etter sykdomsutbrudd.

En høy ASTO-titer styrer diagnosen, men er ikke relatert til alvorlighetsgraden av sykdommen, og dens reduksjon innebærer ikke forbedring.

Antistreptolysin O-antistoffer kryssreagerer mot kollagen og muskelfibre, og påvirker visse organer (blant annet hjerte, hud, ledd og nervesystem).

Denne komplikasjonen eller følgetilstanden forårsaker hjerteinvolvering, feber, generell ubehag, ikke-suppurativ migrerende polyartritt, chorea, etc..

Akutt glomerulonefritt

Akutt glomerulonefritt er en ikke-suppurativ følge som oppstår på grunn av avsetning av antigen-antistoffkomplekser på den glomerulære kjellermembranen.

Dannelse og sirkulasjon av antigen-antistoffkomplekser (ag-ac) generert av streptokokkinfeksjoner kan føre til eksudative endringer og betennelse i glomeruli, med proteinuri og hematuri.

Disse ag-ac-kompleksene er avsatt i glomerulus og aktiverer komplementkaskaden, noe som resulterer i glomerulær endotelskade. Derfor regnes det som en autoimmun sykdom, siden individets immunsystem skader sitt eget vev..

Antistreptolysin O-antistoffer er veldig høye og komplementnivået er lavt.

Referanser

  1. Wiener Laboratories. ASO latex. 2000. Tilgjengelig på: wiener-lab.com.ar
  2. Wikipedia-bidragsytere. "Anti-streptolysin O." Wikipedia, The Free Encyclopedia. Wikipedia, The Free Encyclopedia, 23. januar 2019. Nett. 19. juli 2019.
  3. Kotby A, Habeeb N, Ezz S. Antistreptolysin O titer i helse og sykdom: nivåer og betydning. Pediatr Rep. 2012; 4 (1): e8. Tilgjengelig på: ncbi.nlm.nih
  4.  Sen E, Ramanan A. Hvordan bruke antistreptolysin O-titer. Arch Dis Child Educ Pract Ed. 2014; 99 (6): 231-8. Tilgjengelig på: ncbi.nlm.nih
  5. Koneman E, Allen S, Janda W, Schreckenberger P, Winn W. (2004). Mikrobiologisk diagnose. (5. utg.). Argentina, redaksjonelt Panamericana S.A.
  6. González M, González N. 2011. Manual of Medical Microbiology. 2. utgave, Venezuela: Direktoratet for media og publikasjoner ved University of Carabobo.

Ingen har kommentert denne artikkelen ennå.